腸致病性大腸桿菌核酸檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

產(chǎn)品規(guī)格：48T/盒；

 保存條件：避光 -20度 保存。

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將針筒放入一支15ml離心理中，針筒拿只的喺離心管口上。1600g離心4分鐘，凝膠扤實(shí)后，補(bǔ)加Sephadex G-50凝膠懸液，重復(fù)此步直至凝膠柱高度達(dá)針筒0.9ml刻度處。
4）100ul STE緩沖液洗柱，1600g離心4min。重復(fù)三次。
5）倒咗佢離心理中嘅溶液之后，將一去打嘅1.5ml離心理置于理中，再將裝填咗Sephadex G-50凝膠嘅針筒插入離心理中，針筒口踏正1.5ml離心理。
6）將識(shí)認(rèn)嘅DNA樣品加25 ul STE，拎出0.5ul點(diǎn)樣于DE8 paper上，其余上呀于層析柱上。
7）1600g離心4min，DNA將瀉畀有冇收集喺去打嘅離心理中，而未摻入DNA嘅dNTP篇保留喺層析柱中。攞0.5ul己純化嘅探針點(diǎn)樣于DE8-paper。
8）量過(guò)活性（試劑過(guò)工作要求：106cpm/ml）。
9.預(yù)雜交：
1）將預(yù)雜交液?jiǎn)针s交爐中68℃預(yù)熱，并漩渦令未溶解嘅物質(zhì)溶解。
2）加適當(dāng)嘅ULRAhyb到雜交理中（以100cm2膜積加10mlULRAhyb雜交液），42℃預(yù)雜交4 hr。
10.探針變性：
1）用10 mM EDTA將探針稀釋10倍。
2）90℃熱處理稀釋后探針10min后，即刻放置于雪上5min。
3）短暫離心，將溶液有冇收集到理底。
11.雜交：
1）加0.5ml ULTRAhyb到變性嘅探針中，撈勻之后，將探針加到預(yù)雜交液中。
2）42℃雜交過(guò)夜（14~24hr）。
雜交完之后，將雜交液有冇收集起身于－20℃保存。
12.洗膜：
1）低嚴(yán)緊性洗膜：加Low Stringency Wash Solution#1（100cm2膜積加20ml洗膜溶液），室溫下，震緊洗膜5min兩次。
2）高嚴(yán)緊性洗膜：加High Stringency Wash Solution#2（100cm2膜積加20ml洗膜溶液），42℃震緊洗膜20min兩次。
13.曝光：
1）將膜由洗膜液中拎出，用保鮮膜包住，以防止膜糠。
2）檢查膜上核衰變強(qiáng)度，預(yù)曝光時(shí)間
3）將X光相底覆蓋與膜上，曝光
4）沖洗X光相底，掃描紀(jì)錄結(jié)果。